Estudiando Microscopía y otros Métodos de Estudios en Biología Celular......

A)   La biologia celular tuvo sus inicios en el año 1838 cuando Schneider y Schwan propusieron su Teoria celular basados en investigaciones realizadas gracias al Microscopio optico. Casi un siglo despues (1931) Ruska y col. construyeron el primer Microscopio electronico, que permitio conocer mas intimamente la estructura celular.

        En la actualidad existen diversos tipos de M.O. y M.E. diseñados para la observacion de las celulas en diferentes condiciones.(Por ej. microscopio de contraste de fase)

        Aunque no siempre es necesario un tratamiento previo del material a observar, en la mayoria de los casos este debe ser sometido a  distintas tecnicas de preparacion, que varian segun el tipo de microscopio a usar.

        Los instrumentos opticos no solo se utilizan en investigacion basica, sino que en muchos casos permiten hacer un diagnostico preciso de distintas enfermedades (cancer, enfermedades hematologicas, infecciones por parasitos, bacterias, virus, etc.).

 

PARA UNA AUTOEVALUACION SOBRE EL TEMA   TE PROPONEMOS REALIZAR LAS SIGUIENTES ACTIVIDADES

1- ¿Cual de los siguientes caracteristicas de los M.O. y M.E. es incorrecta?
a. El L.R. del M.O. esta entre 0.18 - 0.25 micras.

b. En el M.O. se pueden observar celulas vivas o muertas.

c. El M.E. esta formado por un sistema de lentes de alta resolucion .

d. El limite de resolucion del M.E. esta entre 3-5 angstron

2- ¿Cual de las siguientes frases define mejor el poder de resolucion?.Marca la opción correcta.

a. Es la minima distancia entre dos puntos para que la lente los muestre separados.

b. Es la mayor distancia entre dos puntos para que la lente los muestre separados.

c. Es la capacidad de una lente de captar mas o menos rayos para la formacion de la imagen.

d. Es la capacidad de un instrumento optico para mostrar puntos vecinos como entidades diferentes.

3-¿ Cuál de las siguientes frases referidas a límite de resolución (LR) y apertura numérica ( A.N.) es incorrecta?.
a. A mayor poder de resolución menor AN.

b. Para aumentar la A.N. se utiliza aceite de cedro.

c. A mayor A.N. se obtiene menor L.R.

d. Para aumentar el P.R se debe disminuir el L.R.

4- Se necesita observar los detalles de los ojos de una mosca. ¿Qué instrumento óptico utilizaría para tal fin ? Marca la opción correcta.

a. Microscopio optico de campo claro.

b. Microscopio óptico de fluorescencia.

c. Lupa compuesta

d. Microscopio electrónico de barrido.

5- Un laboratorista prepara su microscopio óptico de campo claro para analizar un frotis de sangre. Selecciona el objetivo necesario para observar la imagen de los leucocitos aumentada 400 veces. ¿Cuáles serán los aumentos propios del ocular que tenía colocado el microscopio y del objetivo que seleccionó ? Marca la opción correcta.

a. 10x y 100x respectivamente.

b. 10x y 40x respectivamente.

c. 10x y 10x respectivamente.

d. 5x y 40 x respectivamente.

6- ¿Cual de los siguientes tipos de M.O. permiten poner en evidencia, mediante el uso de rodamina, estructuras específicas de diferentes tejidos?. Marca la opción correcta.

a. M.O. de campo claro.

b. M.O. de fluorescencia.

c. M.O. de contraste de fase

d. M.O. de fondo oscuro.

7- En la microfotografia que se muestra a continuación, puedes observar celulas con el nucleo coloreado intensamente con sustancias fluorescentes. Para que estas sustancias exhiban este color brillante es necesario que sus moleculas sean excitadas por rayos de determinada longitud de onda. Marca la opcion correcta.

Para estudiar este tema te recomendamos la siguiente bibliografia

1- La tecnica de autorradiografia permite...... (marca la opción correcta)
a. determinar la composicion quimica de los lisosomas.

b. estudiar la ultraestructura de lo microtubulos citoplasmaticos.

c. definir la ubicacion de las proteinas en la membrana plasmatica.

d. determinar el destino del RNA una vez sintetizado en el nucleo..

2- La tecnica de fraccionamiento celular permite...... (marca la opción correcta)

a. la separacion de vesiculas de REL y RER.

b. observar el movimiento de los cromosomas anafasicos.

c. determinar la ubicacion de las proteinas de la membrana plasmatica.

d. determinar el camino intracelular de una proteina de secrecion.

3- Se estudia una muestra de intestino de raton, alimentado exclusivamente con leche de soja, durante dos meses, despues del destete. El objetivo del investigador es determinar la incidencia de la dieta en la constitucion de la uniones oclusivas. ¿Cual de las siguientes tecnicas seria apropiada para determinar si existen anomalias en la disposicionn de las proteinas transmembranosas de estas uniones?. Marca la opcion correcta.

 

a.Fraccionamiento celular

b.Criofractura

c.Radioautografia

d.Microscopia electronica

4- En una muestra de macrofagos peritoneales obtenida de ratas desnutridas, se desea determinar las enzimas lisosomales. Para ello debemos aislar dichos organoides. ¿Cual de las tecnicas que se enuncian a continuacion podria ser la adecuada ?.Marca la opción correcta.

a. Criofractura

b. Radioautografia

c. Microscopia electronica

d. Fraccionamiento celular

5-De una muestra de sangre periférica, obtenida por punción venosa, se aislan los linfocitos obteniéndose solamente una cantidad limitada de los mismos, que no es suficiente para realizar un análisis cromosómico.¿Cual de las tecnicas que se enuncian a continuacion podria ser la adecuada para obtener mayor número de linfocitos?.Marca la opción correcta.

a. Criofractura

b. Radioautografia

c. Cultivo celular

d. Fraccionamiento celular

6-Se desea determinar si el aminoácido leucina interviene en la síntesis de las enzimas pancreáticas. Para ello, a una muestra del aminoácido se marca con Tritio (elemento radiactivo), y se lo incorpora al medio de cultivo, en el que se hará desarrollar células pancreáticas de cerdo. Con cuál de las técnicas que se enuncian a continuacion es posible estudiar el recorrido de este aminoácido, dentro de la célula, determinando si forma parte de los gránulos de secreción de la célula en multiplicación. (marca la opción correcta)

a. Criofractura

b. Radioautografia

c. Fraccionamiento celular

d. Cultivo celular

B)Las células de los organismos pluricelulares están condenadas a vivir en comunidad y si son separadas del tejido, mueren. No obstante el hombre ha ideado técnicas "in vitro" que permiten no solo mantener vivas a las células aisladas, sino que también pueden reproducirse en el laboratorio mediante cultivos celulares. Estos se realizan en recipientes que aportan una superficie sólida a la cual las células se adhieren y que contienen un medio líquido con nutrientes, factores de crecimiento y otras sustancias necesarias. De esta manera se obtienen cantidades suficientes de células de un mismo tipo, lo que facilita el estudio de su estructura y ultraestructura por microscopía o de sus elementos subcelulares,que puede hacerse mediante diferentes técnicas que se enuncian a continuación :técnicas citoquímicas que permiten localizar un determinado tipo de moléculas , usando para ello reacciones coloreadas específicas de un determinado grupo químico . Fraccionamiento celular el fraccionamiento celular es el proceso físico en el cual se usa la fuerza centrífuga para separar organelas y componentes celulares como función de sus coeficientes de sedimentación.Con la centrifugación diferencial, los organelos celulares pueden ser aislados y sus funciones y composiciones químicas pueden ser determinados "in vitro".Autorradiografía: permite averiguar la localización precisa de moléculas marcadas con isótopos radiactivos suministrados previamente a la célula. Criofractura: se basa en un congelamiento rápido de la muestra celular con una posterior fractura. Se realiza un sombreado con platino, seguido por el agregado de una capa de carbono evaporado.Posibilita el estudio de la estructura molecular de diferentes membranas celulares.

a. microscopio electronico de transmision

b. microscopio de contraste de fase

c. microscopio de fondo oscuro

d. microscopio electronico de barrido

9-¿ Cual de las siguientes afirmaciones constituye una ventaja del microscopio de fluorescencia confocal, con respecto al de fluorescencia comun?. Marca la opción correcta.

a. Utiliza lentes de mayor aumento.

b. Puede utilizarse para el estudio de celulas vivas.

c. Brinda una imagen tridimensional de las estructuras observadas.

d. Se puede emplear mayor numero de colorantes fluorescentes

10-En esta microfotografia puede observarse una muestra de Tripanosoma cruzi ( agente etiologico de la enfermedad de Chagas), coloreados con Giemsa. ¿Con cual de los microscopios enunciados a continuacion fueron observados?. Marca la opción correcta.

a. Rayos X

b. Rayos infrarrojos

c. Luz azul

d. Luz UV

8-A continuación se muestra una microfotografia de las microvellosidades de un epitelio intestinal humano.¿Con cual de los microscopios enunciados a continuacion fue observado?. Marca la opcion correcta.

a. microscopio optico de campo claro

b. microscopio electronico de barrido

c. microscopio de contraste de fase

d. microscopio de fluorescencia

11-En esta microfotografia se observa una muestra granos de polen tomados del aire ambiental. ¿Con cuál de los microscopios enunciados a continuacion fueron observados?. Marca la opción correcta.

a. microscopio de contraste de fase

b. microscopio electronico de barrido

c. microscopio de fondo oscuro

d. microscopio de fluorescencia

PARA UNA AUTOEVALUACION SOBRE EL TEMA   TE PROPONEMOS REALIZAR LAS SIGUIENTES ACTIVIDADES

  • Si encontraste dificultades para resolver las actividades o deseas ampliar el tema, consulta la bibliografia sugerida
  • Visita los sitios Web de interés
  • Recuerda que puedes asistir a las tutorias en la Catedra o enviar un E-mail para CONSULTA

BIBLIOGRAFIA

  • Fundamentos de Biologia Celular y Molecular - De Robertis-Hib- 3 edicion- Editorial El Ateneo.
  • Biologia Celular y Molecular .De Robertis-Hib-Ponzio - 12 Edicion - Editorial El Ateneo.
  • Biologia Molecular de la Celula - Alberts - 3 Edicion - Editorial Omega
  • La Celula - Coopers - 2 Edicion - Editorial Marban
  • Biologia Celular y Molecular - Lodish - 4 Edicion - Editorial Panamericana.

 

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Actualización: 15 de abril de 2009
 
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Para estudiar este tema le recomendamos la siguiente bibliografia

 

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