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Reproducción y Técnicas de siembra |
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Reproducción y Técnicas de siembra |
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Respuestas
1) Describa las formas de reproducción bacteriana.
2) ¿A qué se llama tiempo generacional? Mencione ejemplos.
Es el tiempo que una población microbiana tarda en duplicarse. Es la velocidad de crecimiento.
Ejemplos:
- Escherichia coli tarda 20 minutos
- Mycobacterium tuberculosis tarda 18-24 hs
3) Dibuje una curva típica de crecimiento bacteriano.
4) ¿Cómo logra un cultivo contínuo? ¿Qué fases se ven modificadas? ¿Por qué?
Se puede lograr de dos maneras:
Fases modificadas: la fase exponencial se prolonga, porque no hay depleción de sustrato ni acumulación de productos tóxicos.
5) Esquematice el ciclo de reproducción de los Mycoplasmas.
6) ¿Cuál es el objetivo del recuento de microorganismos?
El objetivo es saber la concentración de microorganismos presentes en una determinada muestra. Se utiliza para:
7) Explique cuenta total. Métodos. Aplicaciones.
Consiste en contar microorganismos vivos y muertos a partir de una muestra.
Métodos:
8) Explique cuenta viable. Métodos. Aplicaciones.
Consiste en contar microorganismos vivos con capacidad para reproducirse a partir de una muestra.
Métodos:
9) ¿Qué diferencias existe entre una siembra por difusión y por diseminación?
Siembra por difusión: primero el inóculo (1 ml) en la placa de Petri y luego el agar (a 45 ºC), homogeneizando.
Siembra por diseminación: el inóculo (0,1 ml) se coloca sobre el agar ya solidificado y se disemina con espátula.
10) Describa la técnica de diluciones sucesivas.
11) ¿A qué se llama unidad formadora de colonia?
Se supone que cada colonia fué formada por un sólo microorganismo. A cada uno de ellos se los llama UFC.
12) ¿Para realizar el recuento qué dilución se debe elegir? ¿Por qué?
La que produjo entre 30 y 300 colonias en la placa de Petri. Porque en ese rango todavía se pueden diferenciar las colonias para ser contadas.
13) Describa la técnica del Número Más Probable (NMP). Aplicaciones.
14) ¿Qué es el nefelómetro de Mc Farland?
Es utilizado para la cuenta total de microorganismos, según el método de turbidimetría.
15) En la dilución 10-3, se cuentan 78 colonias y la muestra fué sembrada por diseminación. ¿Cuál es la cantidad de bacterias que contiene esa muestra? (en UFC/ml)
Cantidad de bacterias = 78 * 1/10-3 * 10
Cantidad de bacterias = 780.000 UFC/ml
16) Se realiza una cuenta viable utilizando la técnica por difusión, a partir de una muestra de salchichas. En la dilución 10-5 se encuentran 146 colonias. Cuál es la cantidad de bacterias que contiene esa muestra?
Cantidad de bacterias = 146 * 1/10-5
Cantidad de bacterias = 14.600.000 UFC/ml
17) A partir de una muestra de orina se realiza una muestra viable por diseminación. En la dilución 10-4 se encuentran 241 colonias. ¿Cuál es la cantidad de bacterias que contiene la muestra?
Cantidad de bacterias = 241 * 1/10-4 * 10
Cantidad de bacterias = 24.100.000 UFC/ml
18) ¿Cuál es el objetivo de la siembra de microorganismos?
A partir de colocar a los m.o. en un medio nutritivo adecuado, su objetivo es obtener aislamientos de bacterias, estudiar las características fisiológicas, metabólicas, morfológicas, etc.
19) ¿Cuál es el objetivo de realizar un aislamiento?
Obtener cultivos puros a partir de una población mixta, y así poder realizar estudios de morfología, fisiología, pruebas bioquímicas, de sensibilidad a antimicrobianos.
20) ¿Qué técnicas de siembra conoce? Describa la aplicación de cada una de ellas.
Según el medio:
Otras:
21) ¿Cuál es la técnica empleada para aislar microorganismos comúnmente?
La técnica más utilizada es el sembrado por agotamiento de superfice mas un reaislamiento (REA) en una segunda placa.
22) ¿Qué métodos utilizaría para cultivar y aislar microorganismos anaerobios?
Recipientes de cierre hermético, reemplazando el aire de su interior por una
mezcla de gases inertes. Estos gases se pueden generar utilizando sobres
generadores de anaerobiosis, que con el agregado de agua generan hidrógeno y
dióxido de carbono (H: 80%, CO2: 20%). El oxígeno residual se
convierte en agua gracias a un catlizador (paladio).
Se debe colocar un indicador de reducción (p.e. azul de metileno) que se
decolorará cuando la atmósfera se encuentre en un estado reducido indicando
anaerobiosis.
23) ¿Cómo obtiene una atmósfera adecuada para cultivar m.o. anaerobios?
Ver pregunta anterior.
24) ¿Qué métodos utiliza para realizar una cuenta viable de anerobios?
Las mismas que para aerobios (diluciones sucesiva o NMP), pero con los
métodos de cultivo señalados en la pregunta 22.
También se pueden realizar las diluciones sucesivas utilizando agar blando +
sustancias reductoras como diluyente (en lugar de sn fisiológica) e incubar
directamente en los tubos. Luego se cuentan las colonias formadas dentro de la
columna de agar.
25) Describa el funcionamiento de una jarra de anaerobiosis.
Estas jarras poseen una tapa con una o dos válvulas para realizar vacío y posterior reemplazo de gases, y así obtener una atmósfera anaeróbica. Se colocan dentro de la jarra catalizadores de paladio o alúmina paladio para convertir el oxígeno residual en agua.
26) ¿Qué es una sustancia reductora? ¿Cuáles conoce?
Es una sustancia que produce que otra sustancia se reduzca, es decir que sufra una ganacia de electrones, mientras que la sustancia reductora se oxidará, es decir perderá electrones.
Sustancias reductoras: glucosa, aminoácidos azufrados, ácidos grasos insaturados.
Aceptores de electrones para anaerobios: nitrato, sulfatos, carbonatos.
