Rilevamento degli stafilococchi aurei meticillino resistenti
Subito, utilizziamo dischi di 1 µg/ml di oxacillina .I break-points sono i seguenti:
1) Metodo della disco diffusione con Oxacillina da 1 µg/ml:
<o = a 10 mm ..Resistente (confermare con E test)
fra 11 e 12 mm .......Intermedio (confermare con E test)
> o = 13 mm .. . ....Sensibile
2) Metodo della determinazione della MIC (E test)
> o = 4 µg/ml ..Resistente
< o = 2 µg/ml .. .Sensibile
Vi possono essere colonie sospette da rilevare nel terreno di coltura per antibiogramma.Secondo alcuni vi è un 100% di casi di resistenza eterogenea.Cioè i casi di stafilococco aureo o coagulasi negativi meticillinoresistenti si possono rilevare attraverso losservazione attenta di colonie puntiformi allinterno dellalone di inibizione.Queste colonie devono essere ripiastrate , reidentificate e ritestate per la MIC con E test.
Invece i casi di VRE (enterococchi vancomicino resistenti) sono piu comuni.La maggior parte dei casi di VRE sono della classe B (vanB con sensibilità alla teicoplanina e bassa resistenza alla vancomicina).La cosa piu preoccupante nel caso del ceppo americano di Stafilococco aureo vancomicina resistente, è che il profilo di resitenza deriva da VRE VanA che si caratterizza per lalta resitenza ai due glicopeptidi (Vancomicina e Teicoplanina).
Ripreso dalla ML brasiliana di Microbiologia clinica.Trad. dal portoghese di G. Bruno.
Test della coagulasi
Vi sono tre metodi.Tutti si basano partendo da 0.5 ml di plasma di coniglio (EDTA) in una provetta di vetro.Linoculo differisce.
1) Nel primo metodo si pone una crescita fresca dellisolato di Stafilococco
direttamente nel plasma, con una ansa o uno stick e si incuba per 4 ore in un blocco
riscaldante a 35°C, e quindi, se è ancora negativo, a temperatura ambiente overnight.La
presenza di un coagulo conferma la ID di Staph aureus.
2) L'altro metodo consiste nel fare crescere lisolato nel brodo
(overnight) e quindi prendere un paio di gocce e cimentarle con il plasma.
3) Il plasma si diluisce 1:10 in un
brodo nutritivo. Si appronta una serie di 0.5 ml per provetta.Si Inocula
direttamente da colonia, si incuba a 35-37 °C per 4 ore, se negativo lasciare overnight a
temperatura ambiente.
E consigliabile data lurgenza usare un test al
lattice rapido per gli isolati da emocoltura.
Senza dubbio il metodo della coagulasi libera è quello di
riferimento rispetto allo slide test.