Práctica No. 5
Determinación de fibra Cruda
Fundamento:
En el proceso de
la determinación de la fibra cruda se trata de simular proceso de digestión que ocurre normalmente
dentro del aparato digestivo de los animales; esta simulación se efectúa
sometiendo a la muestra a una "digestión" (hidrólisis) en un medio
ácido, como ocurriría en el estómago de los animales, y posteriormente se
somete la misma muestra a otra "digestión" en un medio alcalino, como
sucedería en el intestino delgado.
Debemos señalar que en el proceso de digestión
arriba descrito, no intervienen las enzimas digestivas propias del organismo de
los animales y que el proceso se lleva a cabo hirviendo la muestra (primero en
una solución de ácido sulfúrico diluído), seguido de una a ebullición en una
solución de hidróxido de sodio diluída, ello permite la hidrólisis de las
proteínas, grasas y la mayoría de los carbohidratos. Para esta determinación, se requiere que la muestra esté seca y
desengrasada.
La “fibra” de un alimento, hace referencia a
un compuesto complejo formado por celulosa, hemicelulosa y lignina
principalmente (en diferentes proporciones según el tipo de alimento, y el
estado de madurez de este). Los animales rumiantes pueden hacer uso de la fibra
con diverso grado de eficiencia, gracias a la flora bacteriana presente dentro
de su estómago; sin embargo para los animales no rumiantes el uso nutricional
de la fibra se reduce notablemente, animales herbívoros como el conejo y el
caballo pueden ingerir fibra en su dieta y obtener algún provecho de ello, sin
embargo los cerdos, y en especial los carnívoros, no la aprovechan de manera
eficiente, de aquí que en estas especies un contenido elevado de fibra en la
dieta actue como un factor que le resta calidad nutritiva al alimento
Materiales y equipo requeridos.
Aparato digestor para fibra.
Balanza analítica.
Vasos Berzelius de 600 ml.
Bomba de vacío.
Crisol Gooch
2 Matraz Kitasato 500 ml.
Embudo Buchner.
Tela de lino.
Espátula
(o agitador de vidrio)
Vaso de precipìtado de 500 ml
Vaso de precipitados de 250 ml
Extensión o alargadera para crisol Gooch.
Trampa de humedad
Probeta de 100 ml
Termómetro
Desecador
Reactivos
Solución de ácido sulfúrico 0.255 N.
Solución
de hidróxido de sodio 0.313 N.
Alcohol etílico.
Papel filtro (Watman # 41).
Procedimiento
1.-Se
pesa con exactitud aproximadamente 2 g. de muestra seca desengrasada (lo ideal
es utilizar el residuo que le quedó de
la determinación de grasa cruda).
2.-En el vaso de Berzelius colocar 200 ml. de la solución de ácido sulfúrico 0.255 N y se pone a calentar hasta que esté en ebullición.
3.-Cuando la solución de ácido sulfúrico este
hirviendo, se adiciona la muestra y se
deja hervir en el aparato digestor exactamente 30 minutos, procurando que no se
forme espuma y que toda la muestra esté en contacto con la solución.
4.-Preparar el equipo de succión. (Consulte
con su instructor la instalación del mismo). Básicamente implica el conectar de
manera indirecta (vía la trampa de humedad) la bomba de vacío al matraz
Kitasato que servirá para hacer la succión (esto es con el objeto de proteger a
la bomba de vacío de un ingreso de agua hacia el motor).
5.-Poner a calentar agua destilada (aprox. 500ml)
en un vaso de precipitados, y calentar el hidróxido de sodio 0.313 N (200 ml)
en un segundo vaso de precipitados.
6.-Una vez terminado el tiempo
de ebullición, se vacía inmediatamente el contenido del vaso sobre la tela de
lino colocada dentro del embudo Buchner.
7.- Se enciende la bomba de succión y se lava el residuo con
4 porciones (de 100 ml cada una) del
agua destilada caliente (del paso 5).
8. Después
de lavar la muestra, el residuo se transfiere nuevamente de la tela de lino
hacia el vaso de Berzelius, ayudándose con la espátula (o el agitador de
vidrio) y agregando pequeñas porciones de la solución de hidróxido de sodio
0.333N que ha previamente calentado (paso 5),
hasta que se elimine todo el residuo de la tela.
9.- Se coloca el vaso Berzelius en el aparato digestor y se
hierve la muestra por otros 30 minutos exactamente.
10.-Poner a calentar agua destilada (aprox.
500ml) en un vaso de precipitados.
11-Volver a montar el equipo de succión de la
misma forma que en el paso 4.
12.- Con un objeto punzante (tijera, navaja)
realice una marca de identificación en el crisol Gooch. Pesar el crisol en la
balanza analítica. Anotar el peso obtenido.
13.-Pesar el papel filtro que se le
suministre. Anotar el peso obtenido. Colocar dicho papel filtro en el fondo del
crisol Gooch.
14-Una vez terminado el tiempo
de la ebullición alcalina, se vacía inmediatamente el contenido del vaso sobre
la tela de lino colocada dentro del embudo Buchner. (se procede igual que en el
paso 6).
15.-- Se
enciende la bomba de succi6n y se lava el residuo con 4 porciones (de 100 ml cada una) del agua
destilada caliente (la del paso 10).
16.-Después de lavar la muestra, el residuo
se transfiere nuevamente de la tela de lino hacia el crisol Gooch, el cual se debe haber montado sobre una extensión
que lo conecte al equipo de succión. Para hacer la transferencia use 25 ml. de la solución ácida y finalmente se
lava el residuo con 25 ml. de alcohol etílico.
17.-Pasar a secar el crisol Gooch dentro de
la estufa a 100ºC durante 8 horas.
18-Pasar a desecador por 30 minutos, y luego pesar en balanza analítica.
Registrar peso obtenido. NOTA A ESTE
PESO DEBE REDUCIRLE EL PESO DEL PAPEL FILTRO QUE EMPLEO PARA TAPAR LOS
ORIFICIOS DEL CRISOL GOOCH (así obtiene
el peso del crisol con el residuo seco).
19.-Incinerar en la mufla a
600ºC durante 30 minutos.
20.-Pasar a desecador por 40 minutos, y luego
pesar en balanza analítica el crisol y las cenizas que contiene. Registrar el
peso obtenido. (Crisol+cenizas).
Cálculos:
% de Fibra = (*) Peso del
crisol con el residuo seco- Peso del crisol con cenizas X 100
Peso de
muestra usado
(*) OJO: CONSIDERE QUE DEBE DE DESCONTAR EL PESO DEL PAPEL FILTRO PARA OBTENER EL PESO REAL DEL RESIDUO SECO SEGÚN LO SEÑALA LA NOTA DEL PASO 18.
1.-De acuerdo con la clasificación
del NRC para alimentos para animales ¿cuáles son los números que se asignan a
los alimentos con alto contenido de fibra y qué nombres reciben esas clases?.
2.-De acuerdo con los criterios de
clasificación del NRC de alimentos para animales, ¿cuál es el nivel de fibra
que deben tener los alimentos clasificados como forrajes?.
3.-Mencione cuales son las
principales objeciones o críticas que se han hecho al método para la
determinación de fibra cruda bajo el esquema del análisis proximal Weende.
4.-Mencione 3 métodos de
procesamiento que puedan emplearse para aumentar la digestibilidad de las pajas
(las cuales son altas en fibra).
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