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O QUE É O MÉTODO SHOTGUN DE SEQUENCIAMENTO DE DNA?


-A principal diferença entre o sequenciamento “shotgun” e o sequenciamento tradicional é que no método tradicional o DNA era analisado aos poucos. Pedaços do genoma de um organismo eram duplicados, cortados em pedaços ainda menores, colocados em um gel de eletroforese e então seqüenciados. O processo era então repetido novamente até que, de pedaço em pedaço, todo o genoma era seqüenciado.
Esse processo tradicional, obviamente, levava muito tempo.

-No método “shotgun”, por outro lado, grandes quantidades DNA, eventualmente todo o genoma de um organismo, é analisado simultaneamente o que torna o processo muito mais rápido. O genoma do organismo é todo duplicado (clonado) e cortado em pequenos pedaços que são seqüenciados. O grande desafio do método shotgun são os computadores muito poderosos necessários para organizar a gigantesca “bagunça” das combinações possíveis de todos as pequenas seqüências em um único genoma coerente. É como picotar um livro de milhares de páginas em um monte de recortes de frases e depois ter que montar tudo de volta na forma de um livro que faça sentido. É por isso que o sucesso do método shotgun se deveu mais ao desenvolvimento de novas técnicas computacionais do que a descoberta de um novo método bioquímico de sequenciamento.