CONGRESO INTERNACIONAL

Actividad antibacteriana de propóleos argentinos enfrentados a Staphylococcus aureus.

Avaliação da atividade relaxante do extrato padronizado de própolis p1 sobre músculo liso das vias aéreas. Evidencia para multiplos mecanismos de ação.

Avaliação, "in vitro" da atividade antimicrobiana da própolis. Estudo comparativo de técnicas microbiológicas na avaliação de extratos de propolis obtidos por diferentes métodos.

Classificação das própolis brasileira através de suas características fisico-químicas e propriedades biológicas.

Comparison between chemical composition and antimicrobial activity of different propolis from poplar buds with special emphysis of Egyptian propolis.

Determinación de características físico-químicas del propóleos de la provincia de Sgo del Estero.

Effects of propolis on the accumulation of cholesterol induced by high-cholesterol diet in rats.

Influencia de los compuestos fenólicos del propóleos sobre el índice de oxidación.

Otimização de processo extrativo de própolis visando a atividade antimicrobiana.

Protective effects of Turkish propolis on ethanol- induced serum lipids chance and the liver injury.

Início de um programa de seleção de abelhas africanizadas para a melhoria na produção de própolis.

Susceptibilidade de bactérias do grupo bacteroides fragilis a antimicrobianos e à própolis.

The effect of some turkish propolis on the product quantity of Agaricus bisporus (Lange.) Sing.

ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE PROPOLEOS ARGENTINOS ENFRENTADOS A Staphylococcus aureus

Tabera, A, Bedascarrasbure, E.*; Maldonado, L.*; Alvarez, A.*; van der Horst, A.*

Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.

Paraje Arroyo Seco s/n – (7000) Tandil – Buenos Aires – República Argentina.

Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA) – EEA Famaillá. Ruta Provincial 301. Km 32- (4132) – Padilla – Famaillá – Tucumán – Argentina. Email: ebedas@inta.gov.ar; lmaldo@inta.gov.ar; aalvarez@inta.gov.ar; anvander@inta.gov.ar

El propóleos es un producto resinoso extraído por las abejas a partir de cortezas de ciertos árboles y arbustos silvestres, que los utilizan para proteger la colmena de daños externos, y también como material de construcción, reparación y aislamiento. Estos daños se deben a la entrada de organismos tanto micro como macroscópicos (desde bacterias, hongos, etc.; hasta ratas, insectos), inclusive corrientes de aire, humedad; y la protección se produce gracias a la acción antibiótica del propóleos. Debido a esta acción y por ser una sustancia natural e inocua es ampliamente utilizada tanto internamente contra infecciones de vías respiratorias (anginas, faringitis, bronquitis), digestivas (gingivitis); como externamente en lesiones de piel (heridas, quemaduras, úlceras, abscesos).

Posee una composición química compleja y la acción farmacológica la ejerce a través de sustancias tales como: flavonoides, fenoles, oligoelementos, ácidos muy poderosos, desde el punto de vista reparador, sobre el organismo humano o animal.

El objetivo de este estudio fue la investigación de la actividad antimicrobiana de propóleos (extractos etanólicos) de distintas procedencias de la Argentina, enfrentados con cepas ATCC de Staphylococcus aureus (penicilina G resistente).

Se analizaron 35 muestras de extractos etanólicos de propóleos. La actividad antibacteriana se observó por la presencia de halos de inhibición por el método de difusión en placa en pocillos. El inóculo se preparó a partir de un cultivo puro y fresco de Staphylococcus aureus ATCC 25923. Se arrastró la biomasa en condiciones asépticas con solución fisiológica estéril hasta alcanzar la turbidez del tubo 0,5 de la Escala de Mc Farland. En cada placa se utilizó un pocillo con etanol al 70% para control negativo. Se cargó los pocillos con las muestras al 10%, se llevó a refrigeración durante 2 horas y luego fue incubado aeróbicamente a 35 – 37 °C durante 18 – 24 hs.

Luego de la incubación se realizaron las lecturas tomando como positivo los orificios en cuyo entorno se observaron halos de inhibición transparentes. Los extractos que presentaron halos de inhibición fueron aceptados. La medición de halos se realizó con un calibrador (tomando el promedio del diámetro de inhibición en distintas direcciones para minimizar el error).

Los resultados de la actividad antibacteriana de extractos etanólicos de propóleos fueron expresados en milímetros, considerando valores promedios por provincia:

Por lo expuesto se deduce que las muestras de las provincias del Noroeste tienen mayor poder antibacteriano frente a Staphylococcus aureus, que el resto de las regiones del país.

Mariela González ¹, Madelis Rojas Hernández ², Elida Romano ¹, Roxana Rudyk, María A.A.Molina ¹and Ana González Guerra ².

Universidad Nacional de Tucumán. Ayacucho 491. (4000). San Miguel de Tucumán. República Argentina.

2- Laboratorio de Referencia de Investigación y Salud Apícola. Circunvalación y Carretera Central. Sancti Spiritus. Cuba

American countries propolis samples deriving from the Apis mellifera bee and known to be biologically active were analysed. Phytochemical screening and quality analyses of 38 propolis samples collected were carried out. The analyses indicated that 2.63% propolis samples contained cardenolide glycosides, 2.63% amines, 71.05% flavonoids, 94.74% triterpenes and/or steroids, 76.31% quinones, and 96.74% lactones; lipids and/or essentials oils, phenols and/or tannins and reducer sugars were found in all samples; alkaloids and saponines were absent. The wax contents varied between 0.06% and 44%, the oxidation index ranged from 1 to 36 seconds, mechanical mixtures from 23.5 to 68.21%, and phenolic compounds from 1.14 to 53.75%.

Key words: propolis, beehive products, phytochemical screening, chemical analyses.

National Research Center and *Animal Health Research Institute, Dokki, Giza, Egypt.

Four propolis samples from Austria, Egypt, France and Germany were investigated by GC/MS, where twenty compounds were being new for propolis. The samples showed some similarities in their qualitative composition. Phenylethyl-trans-caffeate, benzyl ferulate and galangin were predominant in German propolis. Benzyl caffeate was predominant in French sample. Pinocembrin was predominant in French and Austrian propolis and trans-p-coumaric acid was predominant in all samples. Egyptian propolis is characterized by the presence of unusual esters of caffeic acid with C12- C16 fatty alcohols, mainly saturated.

The antiviral activity propolis samples from Austria, Egypt, France and Germany against avian Roe virus and Infectious Bursal Disease virus was evaluated. All propolis samples reduced the viral infectivity but it is varied according to the propolis origin. Egyptian propolis showed the highest antiviral activity against Roe virus and Infectious Bursal Disease virus.

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE RELAXANTE DO EXTRATO PADRONIZADO DE PRÓPOLIS P1 SOBRE MÚSCULO LISO DAS VIAS AÉREAS.

Paulino, Niraldo; Scremin, Fernando Mateus; Paulino, Amarilis Scremin; Raichaski, Lisiane Benincá; Marcucci, Maria Cristina*; Calixto, João Batista**

Grupo de Pesquisa e Desenvolvimento de Biofármacos (BIOFAR), Universidade do Sul de Santa Catarina, UNISUL. Av. José Acácio Moreira, 787.Tubarão/SC CEP 88704-900 – Brasil.

* Departamento de Pós Graduação, Universidade Bandeirante de São Paulo, São Paulo/SP - Brasil

** Departamento de Farmacologia, Universidade do Sul de Santa Catarina, Florianópolis/SC - Brasil

Propolis is a natural product produced by bees. In the folk medicine propolis is used in the treatment of respiratory diseases. The objective this work is to evaluate the effect of ethanolic extract of propolis (EEP) on the smooth muscle of guinea pig isolated trachea, and to investigate its pharmacological mechanisms of action.

Guinea pigs (both sexes, 250-400g) were killed by cervical dislocation, trachea was removed and cut in six transversal segments containing three rings. These preparations were suspended in a organ bath containing Krebs-Henseleit at 37ºC, pH 7.4, and gazed with a mixture of O₂ 95% and CO₂ 5%. The isometric relaxant responses were measure by means of force displacement transducer (TRI-201) coupled to a Polygraph 6006 (Letica Scientific Instruments). Incubation of the phenolic compounds isolated from propolis, in the bath, produced a relaxant response in the guinea pig isolated trachea. The EEP (10^-10-10^-6g.mL^-1) induced a relaxant effect in the preparations with or without epithelium, precontracted by histamine, with CE50 means 4.4 (1.6-11.9) ng.mL^-1 or 20.6 (5.9-71.1) m g.mL^-1 respectively. Presence of KCl 40 or 80mM in the medium produced a inhibition of 26.0 (± 9.0)% or 92.8 (± 2.73)%, respectively. The addition of TEA (100 m M) or 4-AP (10m M) inhibited 31.0 (± 9.8) or 28 (± 1.5)% of relaxant response of EEP. Apamin (0.1 m M or 0,3 m M) inhibit 65.0 (± 2.9) or75.0 (± 3.5), while charybdotoxin (0,1 m M) inhibit 60.0 (± 5.5)% and glibenclamide (1 or 3 m M) inhibit 57.0 (± 4.0) or 58.0 (± 8.5)%. Iberiotoxin (0.1 m M) produced a rightward displacement of 1.4 times in the relaxant response curve to EEP. w -conotoxin GIVA (0.1m M) and capsaicin (1 m M) did not affect the relaxant response curve induced by EEP. Furthermore, D-p-Cl-Phe6,Leu17[VIP] (0.1 m M) inhibited 55.0 (± 5.7)% and propranolol caused a parallel displacement to the right of 250 times in the relaxant curve to EEP. L-NOArg (10 or 100 m M) inhibited 48.0 (± 6.3)% or 49.0 (4.6)%, while methilene blue (10m M) inhibit 37.4 (± 5.8)%, or ODQ (1 m M) produced a displacement to the right 0.65 times in the relaxant effect of propolis in the guinea pig isolated trachea. Take together theses results shown that multiples mechanisms of actions are involved in the relaxant propolis-induced response on the smooth muscle of guinea pig isolated trachea. These results, also indicated that the principal propolis relaxant signaling pathway involved in response include direct activation of potassium channels, modulation of VIP or b -adrenoceptors receptors and the nitric oxide pathway.

da própolis. Estudo comparativo de técnicas microbiológicas na avaliação de extratos de Propolis

Aluna de Mestrado em Ciências Farmacêuticas, Universidade São Francisco, Bragança Paulista, SP. Endereço: Rua Mario Gianeschi 533, V. Gilglio, Atibaia, SP, Brasil, telefone 011- 484-5871. Email: franksawaya@amhanet.com.br.

* Coordenador do Mestrado em Ciências Farmacêuticas, USF, Bragança Paulista , SP.

A própolis é uma resina coletada pelas abelhas para reforçar os favos e manter a assepsia da colmeia. Devido a sua atividade antimicrobiana já era utilizada pelos egípcios e pelos gregos para cuidar de feridas e supurações. Hoje em dia é encontrada na composição de diversas formulações e freqüentemente utilizada pela população para cuidar de afeções causadas por microorganismos.

Este trabalho tem dois objetivos: 1. avaliar a atividade antimicrobiana de amostras de própolis extraídas por diferentes métodos, visando comparar sua atividade frente a diferentes microorganismos; 2. comparar diferentes técnicas microbiológicas de avaliação da atividade antimicrobiana. As cinco técnicas usadas foram a bioautografia, diluição seriada em tubos e em placas, difusão em placas usando discos de papel e cilindros de aço. As amostras de própolis foram extraídas variando as concentrações de etanol e água do solvente extrator, o tempo e temperatura de extração e o fator luz; obtendo um total de 26 amostras de própolis a partir de 3 lotes de própolis bruta. Para avaliar estas amostras foram utilizadas 16 cepas de bactérias (gêneros Staphylococcus e Streptococcus) e 18 cepas de leveduras ( gênero Candida). Para a avaliação estatística dos resultados foi usado o método de análise exploratória de dados multivariados.

Comparando os resultados obtidos nos diferentes métodos de avaliação foi possível observar quais os fatores que afetaram a composição e atividade antimicrobiana das amostras testadas. Os fatores luz e tempo de extração não afetaram a atividade antimicrobiana das amostras de própolis, porém, o solvente usado na extração das amostras de própolis afetou a composição e consequentemente a atividade antimicrobiana destas. Os melhores resultados frente a bactérias foram obtidos com amostras extraídas com concentrações de etanol entre 50 e 70%.

O método de avaliação microbiológica usado também afetou os resultados, pois os testes de difusão em placas são diretamente influenciados pela hidrossolubilidade dos componentes das amostras de própolis, dando resultados favoráveis às amostras mais hidrossolúveis. Os métodos de bioautografia, diluição seriada em tubos e em placas, aparentemente não foram afetadas por este fator, fornecendo resultados confiáveis.

Key words: Própolis, atividade antimicrobiana, métodos de extração, métodos de avaliação microbiológica, bioautografia.

National Research Center, Giza, Egypt. Email: ahmedgaffer@frcu.eun.eg // samira@mena.org.eg

Propolis (bee glue) is the substance used by bees as a draught exuded and general purpose scalar for their hives. Propolis contains a number of phenolic constituents with antimicrobial, antifungal antiviral, immunostimulant and antioxidant activities.

Egyptian propolis was analyzed by gas chromatography mass spectrometry. 31 peaks were located of which 26 representing 25 compounds were identified. Seven compounds were identified in Egyptian propolis for the first time.

The constituents were phenolic acid esters (72.7 %); phenolic acids (1.1 %); aliphatic acids (2.4 %); dihydrochalcones (6.5 %); Chalcones (1.7 %); flavanones (1.9 %); flavones (4.6 %) and tetrahydrofuran derivatives (0.7 %). It was clear that phenolic acid esters are present in a major quantity (72.7 %).

Evaluation of Egyptian propolis as immunostimulant, antiviral, antibacterial and antifungal agents were done and showed that the Egyptian propolis has such activities.

Universidade Estadual de Campinas – UNICAMP, Faculdade de Engenharia de Alimentos, Caixa Postal 6177, CEP 13081 - 970, Campinas – SP, Fone: 55-19-788-7055, Fax: 55-19-788-7890. Email: ykpark@fea.unicamp.br

We have collected 500 propolis samples which were collected by Africanized Apis mellifera in Southern, Southeastern, Central western, and Northeastern Brazil. The respective samples were extracted with ethanol. The ethanolic extracts of propolis (EEP) were analyzed by physicochemical methods such as appearance of EEP, measurement of absorption spectra by UV-spectrophotometry, reversed phase-thin layer chromatography (RP-HPTLC), reversed phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) and then the EEPs were evaluated their physiological activities such as antioxidant activity, antimicrobial activity, assay of cytotoxic activity to cancer cells, and HIV-growth inhibition assays. In accordance with results of EEP appearance, UV-absorption spectra, RP-HPTLC, and RP-HPLC, the propolis were classified as 12 groups. Among 12 groups of propolis, five groups of propolis were collected from Southern Brazil, whereas six groups of propolis were collected from Northeastern Brazil. Furthermore, one group of propolis was found in Southeastern Brazil. It was found that the variety of propolis is depending on plant ecology. Although rarely exceptional propolis was found in spite of geographic locations, these propolis were not included in this study. Physiological activities for 12 groups of propolis were also variables, depending on geographical location. This is due to fact that the compositions of propolis are depending on the compositions in plants.

AND ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF DIFFERENT PROPOLIS FROM POPLAR BUDS WITH SPECIAL EMPHYSIS OF EGYPTIAN PROPOLIS

National Research Center, Giza, Egypt. Email: ahmedgaffer@frcu.eun.eg // samira@mena.org.eg

Propolis from different countries with different climate were investigated, the main plant source of propolis being always poplar buds. Investigations were concentrated on "balsam" (extract with 70% ethanol). Propolis samples from Albania, Austria, Bulgaria, France, Egypt, Germany and Mongolia have been investigated and the results obtained compared with propolis from England.

Egyptian, Albanian, Austrian, Bulgarian, French, German, Mongolian and British propolis showed significant qualitative similarities. The quantitative differences obtained could be due to the participation of different poplar species. In some regions small amount of propolis could be collected from other plants, too. Egyptian propolis is characterized by the presence of unusual esters of caffeic acid with C12- C16 fatty alcohols, mainly saturated. These esters have not been found till now in propolis. A series of triterpenes in Egyptian propolis, lanosterol were also identified. Phenylethyl-trans-caffeate, pinokansin acetate and galangin were predominant in German propolis. Pinocembrin was predominant in Bulgarian and British propolis and trans-p-coumaric acid was in German and British.3-methyl-2-butenyl-caffeate was predominant in Mangolian and Albanian propolis and 3-methyl-3-butenyl-caffeate in Albanian propolis only.

The antimicrobial activity of propolis collected from different countries against Staphylococcus aureus; Escherichia coli, and Candida albicans were investigated. All propolis samples showed an inhibition in the growth of all examined microorganisms but the inhibition varied according to the propolis origin. It was obvious that German and Egyptian propolis showed the highest antimicrobial activity against Staphylococcus aureus while it was highest in Mongolian, German and Egyptian propolis against Escherichia coli, but Egyptian and Austrian propolis has the highest activity against Candida albicans.

DETERMINACION DE CARACTERISTICAS FISICO-QUIMICAS DEL PROPOLEOS DE LA PROVINCIA DE SGO DEL ESTERO

Facultad de Agronomía y Agroindustrias. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Avda. Belgrano 1912. Sgo del Estero. República Argentina. Teléfono: 0381-4509528. Fax: 0381-4214499.

La provincia de Santiago del Estero ocupa el sexto lugar dentro de las provincias productoras de miel, actualmente cuenta con 40.000 colmenas, la mayoría de las cuales se encuentran ubicadas en los departamentos Capital, Banda y Robles, considerando estas cifras y el aumento considerable de la demanda externa de propóleos tipificado, se hace necesario establecer las características del propóleos santiagueño.

El objetivo general de este trabajo de investigación fue evaluar las características físico-químicas del propóleos de la provincia. Para ello se tomaron muestras por raspado de los departamentos Capital, Banda y Robles.

Los propóleos analizados mediante pruebas sensoriales presentaron estructura homogénea, en trozos irregulares con brillo (41.18% de las muestras) y con poco brillo u opacos (29.41% para cada tipo). La consistencia fue dura para el 47.06% de las muestras, y poco blanda y blanda para el 35.29% y 17.65% de las muestras respectivamente. La coloración de los propóleos estudiados fue variada : marrón claro con tintes castaños (5.88%), marrón oscuro con tintes castaños (11.77%), marrón oscuro con tintes amarillos (5.88%) presentando la mayoría (76.74%) color marrón oscuro. Se detectó sabor picante en todas las muestras y el olor predominante fue resinoso aromático (58.82%).

Con respecto a las características físico-químicas y utilizando técnicas de extracción con solventes adecuados para cada componente, se determinó que el contenido de impurezas mecánicas osciló entre un mínimo de 9.98% y un máximo de 37.14%; el contenido de cera varió entre 17.04% y 49.08% y el de resinas entre 35.05% y 54.14%. La variación del índice de oxidación fue desde un mínimo de 3 hasta un máximo de 18 segundos.

Todas las muestras, sin excepción, presentaron reacción positiva a la presencia de flavonoides y con la técnica espectrofotométrica del cloruro de aluminio se determinó que el valor mínimo del contenido de dichos compuestos expresados como quercetina fue 0.23 %, correspondiendo un 2.02 % al valor máximo. Mediante la técnica espectrofotométrica que utiliza el reactivo de Folin Ciocalteus la concentración de los compuestos fenólicos, expresados como ácido gálico equivalente, osciló entre 4.25 % y 24.73 %.

Los resultados precedentes permiten concluir que los propóleos analizados son de buena calidad, destacándose el contenido de flavonoides, que permite clasificarlos como propóleos de tenor medio de estos compuestos.

Sosa López A.A.; Maidana J.F.*; Bedascarrrasbure E.L.**; Subovsky M.J.; Ramírez S.S.; Castillo A.E.

Cátedra de Química Orgánica y Biológica – Facultad de Ciencias Agrarias – Universidad Nacional del Nordeste. Sargento Cabral 2131 – (3400) - Corrientes – República Argentina. Email: avallejos@agr.unne.edu.ar

* Responsable a cargo del Centro de Investigaciones Apícolas – Facultad de Ciencias Agrarias – Universidad Nacional de Santiago del Estero – República Argentina.

** Director Nacional del Proyecto Integrado de Desarrollo Apícola – Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria – Estación Experimental Famaillá – República Argentina.

En general es aceptada la existencia de una amplia variabilidad en la composición de los propóleos, debida entre otras cosas a las diferentes fuentes vegetales, ubicación en la colmena, región fitogeográfica, etc. De los 19 minerales encontrados en el propóleos, uno de los más importantes es el Cinc por su rol en las propiedades antiinflamatorias y antioxidantes.

El objetivo del presente trabajo fue realizar una primera aproximación a la determinación de la concentración del elemento Cinc en los propóleos del Noreste Argentino. Se trabajo con 17 muestras procedentes de las provincias de Corrientes, Chaco y Misiones, obtenidas mediante el uso de mallas tipo mosquitero y por raspado, realizándose cuatro determinaciones por muestra mediante Espectrofotometría de Absorción Atómica.

Los resultados obtenidos indican una amplia variabilidad en el contenido de Cinc, con valores que fluctuaron entre 10,29 mg/kg^-1 y 105,84 mg/kg^-1. Dentro de un mismo apiario se encontraron resultados más homogéneos en el propóleos obtenido mediante mallas (30,77 a 58,80 mg/kg^-1) que en el de raspado (11,66 a 64,82 mg/kg^-1). Para una misma colmena se encontró mayor concentración de Zn en el interior de la colmena que en el propóleos de la piquera.

Si bien es necesario continuar con los trabajos, los resultados obtenidos permiten inferir que la concentración de Cinc del propóleos se encuentra influenciada no solo por la región fitogeográfica, sino también por el método de extracción y la zona de la colmena.

Ministerio de Salud Publica. Facultad de Ciencias Medicas. "MARIANA GRAJALES COELLO" HOLGUIN. Cuba

Con la finalidad de contribuir a la aplicación de la propoleoterapia en las diferentes alteraciones pulporradiculares se realizó un estudio cuasiexperimental con muestra de 62 pacientes, los cuales asistieron a la consulta de Atención Primaria del Departamento de Estomatología en la Policlínica "Mario Gutierrez Ardaya" del Municipio Holguín en el período correspondiente del primero de Enero al treinta de Junio del año 1999 a los cuales se les había indicado tratamiento pulporradicular.

Los datos fueron recogidos en un formulario confeccionado al efecto, además de la Historia Clínica de Endodoncia evolucionando con intervalo de siete días. Se determinó la efectividad de la tintura de propóleos al 5% en los pacientes tratados, con resultados significativos a favor de los que curaron. Se valoró el tiempo promedio para concluir el tratamiento, el cual se logró entre los siete y catorce días de iniciado el mismo. No se detectaron cambios en la coloración del diente tratado, sólo se encontraron 5 pacientes con cambios en la coloración del diente antes de iniciar el tratamiento, aspecto que atribuimos a la alteración crónica que ocasionó la muerte pulpar. No se observaron cambios durante el tratamiento ni al finalizar el mismo. No se produjeron reacciones adversas.

Por los resultados obtenidos se recomienda el uso de la tintura de propóleos al 5% como cura Medicamentosa intraconducto en el tratamiento pulporradicular, así como continuar investigando la posibilidad de utilizarlo durante todo el tratamiento en diferentes formas farmacéuticas e intentar realizar la obturación definitiva con conos elaborados a partir de este apifármaco de magnificas propiedades.

EFFECTS OF PROPOLIS ON THE ACCUMULATION OF CHOLESTEROL INDUCED BY HIGH-CHOLESTEROL DIET IN RATS

Department of Immunopharmacology, Faculty of Veterinary Medicine, Phone : +82-33-250-8653.

*College of Pharmacy, Kang-Won National University, Chunchon, Kang-Won Do, Korea, 200-701.

**Biosoft Techonology, Biotechnology Innovation Center, Chunchon, Kang-Won Do, Korea, 200-160.

To investigate the effects WEP on cholesterol metabolism, 24 male SD rats weighing 90-120g each (5 weeks old) were divided into 4 groups and subjected to one of the following treatments. Group A (negative control group) received basal diets. Group B (positive control group) received additionally 1 % cholesterol and 0.25% sodium cholate; and Group C and D received same diets as group B but additionally supplemented 75 mg/kg -and 150 mg/kg- WEP orally for 6 weeks, respectively.

Total cholesterol and triglyceride levels in serum of SD rats decreased significantly in 75mg/kg -and 150mg/kg- WEP groups in rats fed 1 % cholesterol and 0.25% sodium cholate in the diets.

Serum LDL-cholesterol level decreased significantly by adding 75mg/kg -and 150mg/kg- WEP in rats fed 1 % cholesterol and 0.25% of sodium cholate in the diets.

Levels of serum MDA were lower in WEP groups to high-cholesterol diets group. In addition, HDL-cholesterol increased significantly by adding 75mg/kg- and 150mg/kg-WEP, resulting in a significant increase in the HDL-cholesterol/total cholesterol ratio and a reduction of atherosclerotic index. The contents of all classes of lipid in liver increased by dietary cholesterol. Of the liver lipid, triglyceride may show a fatty liver syndrome.

These results suggest that total cholesterol, TG, lower LDL-cholesterol and MDA level, and higher HDL-cholesterol level in serum of rats may be effectively modulated by administration of propolis.

In summary, propolis may have an antiartherogenic effect of reducing serum cholesterol, LDL-cholesterol and MDA level , and increasing HDL-cholesterol level.

National Research Center, Dokki, Giza, Egypt - Email: ahmedgaffer@frcu.eun.eg // samira@mena.org.eg

The antifungal activity of Egyptian propolis against 9 genera of fungi was determined. These genera are belonging to Cladosporium, Mucor, Scopulariopsis, Penicillium, Rhizopus, Fusarium, Aspergillus, Alternaria and Rhodotyrlla. The results revealed that Egyptian propolis induced inhibition of fungal growth. This inhibition varied according to the type of fungi. The minimal inhibitory concentration of propolis ranged from 1,20 – 3.60 mg/ml. It was obvious that the minimum inhibitory concentration was 3.60 mg/ml for Alternaria and Fusarium whereas the concentration (1.20 mg/ml) was recorded for Aspergillus and Penicillium.

INFLUENCIA DE LOS COMPUESTOS FENOLICOS DEL PROPOLEOS SOBRE EL INDICE DE OXIDACION

Centro de Investigaciones Apícolas-CEDIA - Facultad de Agronomía y Agroindustrias - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Sgo del Estero. República Argentina. Email: jmai@unse.edu.ar

El objetivo fundamental del presente trabajo, fue investigar el grado de influencia que ejercen los compuestos fenólicos en el índice de oxidación, el cual constituye un test analítico para verificar la propiedad antioxidante del propóleos, y por lo tanto su calidad.

De las diez regiones fitogeográficas argentinas, (selva misionera, selva tucumano-boliviana, parque chaqueño, parque mesopotámico, desierto andino, monte occidental, estepa pampeana, bosque pampeano y bosque subantártico), excepto la estepa patagónica, se recolectaron en total 115 muestras de propóleos, de colmenas existentes en esas regiones.

Las muestras de propóleos en bruto fueron analizadas en el laboratorio, a partir de las siguientes determinaciones:

De acuerdo al análisis de los datos obtenidos, es conveniente puntualizar que el valor del índice de oxidación en los propóleos está condicionado en gran parte, por los compuestos fenólicos provenientes de la fuente vegetal de la cual extrae la abeja las resinas para la elaboración del propóleos, y en menor medida por los ácidos grasos insaturados de cadena abierta, provenientes de la abeja.

Al analizar el índice de oxidación en relación a los compuestos fenólicos, se puede afirmar con un porcentaje del 97,39 % de confianza, que las muestras de propóleos analizadas que superan el 7 % del contenido de compuestos fenólicos, poseen un valor de índice de oxidación menor a 22 segundos; (tres muestras del total de 115, se apartan de esta regla).

Al analizar la correlación entre el índice de oxidación y el contenido de fenoles, esta no es totalmente estrecha (coeficiente de correlación r = -0,6307), y es posible que esto suceda porque algunos propóleos tengan una mayor concentración de compuestos fenólicos que decoloren a mayor velocidad el permanganato de potasio, o bien contengan ácidos no fenólicos insaturados, como el cinámico, junto con los ácidos grasos insaturados de cadena abierta, provenientes del metabolismo de la abeja.

OTIMIZAÇÃO DE PROCESSO EXTRATIVO DE PRÓPOLIS VISANDO A ATIVIDADE ANTIMICROBIANA

Cristiano Rodrigues dos Santos, Gabrielle Luck de Araújo, Eliane Souza Carvalho, Nikolai Sharapin, Lenise Arneiro Teixeira, Geraldo Breyer, Leandro Machado Rocha

Laboratório de Tecnologia de Produtos Naturais (LTPN) - Faculdade de Farmácia - Universidade Federal Fluminense - Rua Dr. Mário Viana, 523- Santa Rosa, Niterói-RJ, Cep: 24241-002. Email: Farm@cruiser.com.br

Própolis, conhecido como "cola das abelhas", designa uma mistura de gomas, resinas e bálsamos de viscosidade consistente, os quais são coletados principalmente das inflorescências e cascas das plantas pelas abelhas melíficas. O uso do própolis pelo homem é muito antigo devido principalmente as atividades antibióticas, antifúngicas, antivirais, e apesar de apresentar reações alérgicas, ele é relativamente de baixa toxicidade. Entre outros constituintes químicos, o própolis contêm ácidos aminados, flavonóides, terpenóides e derivados do ácido cinâmico. Sua composição química não é constante, pois varia de acordo com a floração usada pelas abelhas para a elaboração da mesma, por essa razão a determinação de um método de análise química aplicável a amostras de diversas procedências se tornana necessária. Este trabalho tem como objetivo a otimização do processo extrativo de própolis, originário da cidade de Pirassununga (SP), visando determinar a concentração que dá a maior atividade antimicrobiana.

A eficácia da extração foi medida utilizando-se alcoolaturas de diferentes concentrações frente a análise de atividade antibacteriana pelo método de impregnação de discos. Para tal, 40 m l de cada extrato foram aplicados em discos de papel padrão para antibiograma, utilizando-se cepa de Staphylococcus aureus multiresistente (PI57) em meio de agar Muller-Hinton. As alcoolaturas foram obtidas apartir da extração de 10g de própolis com álcool etílico 96%, variando-se de 10 a 90% a mistura água-álcool até 100% de água pura. Os resultados foram avaliados pelos valores dos halos de inibição obtidos comparados ao antibiótico vancomicina e são apresentados na tabela 1, a seguir:

Tabela1: Atividade antimicrobiana de extratos de própolis obtida pelo uso de telas, originário da cidade de Pirassununga (SP) contra Staphylococcus aureus multiresistente.

AMOSTRAS	ALCOOLATURA DA EXTRAÇÃO (40m l)	HALO DE INIBIÇÃO(mm)
1	Álcool 96%	9
2	Álcool 90%	10
3	Álcool 80%	10
4	Álcool 70%	10
5	Álcool 60%	10
6	Álcool 50%	10
7	Álcool 40%	9
8	Álcool 30%	8 (presença de colônias resistentes)
9	Álcool 20%	nenhum
10	Álcool 10%	nenhum
11	Água pura	nenhum
Vancomicina		18

Baseado nestes resultados conclui-se que os extratos mais ativos foram aqueles obtidos utilizando-se, para extração, misturas de água-álcool entre 90 e 50%. Sugerindo assim, o seu uso medicinal, como um produto antibacteriano nestas concentrações.

INTA EEA H. Ascasubi, PROAPI -CAMBIO RURAL. CC8 - (8142) H. Ascasubi, Argentina.

** INTA EEA Famaillá, PROAPI. Ruta 301 Km32 CC11 - (4132) Famaillá, Argentina.

PROTECTIVE EFFECTS OF TURKISH PROPOLIS ON ETHANOL- INDUCED SERUM LIPIDS CHANCE AND THE LIVER INJURY

* Hacettepe University, Science Faculty, Department of Biology,06532 Beytepe Campus, ANKARA/TURKEY

** Hacettepe University, Science Faculty, Department of Chemistry, 06532 Beytepe Campus, ANKARA/TURKEY

Propolis is a multi functional material used by bees in the construction and maintenance of their hives. Use of propolis by humans has a long history, predated only by the discovery of honey. Unlike many natural remedies, there is a substantive database on the biological activity and toxicity of propolis indicating that it may have many antibiotic, antifugal and antitumoral properties among other attributes. Propolis is relatively non-toxic, with a no-effect level (NOEL) in a 90-mouse study of 1400 mg/kg body weight/day. The flavanoids concentrated in propolis are powerful antioxidants, and they have been shown to be capable of scavenging free radicals and thereby protecting lipids. Although there is a report about their hepatoprotective effects and protective effects against atherosclerosis and alcohol, there are few data about the antioxidant mechanisms of these protective action of propolis.

In this study, we investigated protective effect of Turkish propolis against oxidative stress induced with ethanol. Ethanol extract of Castanea sativa propolis was prepared in 95% of ethanol and this propolis extract at dose of 200 mg/kg body weight/day was then given oral route to 185-210 g male Swiss albino rats during two weeks. Also, 20% of ethanol was given to rats in alchol-stress group during two weeks. After the two weeks, all animals were sacrified by decapitation. The blood samples were taken and total trigliceride, cholesterol, HDL, LDL, and serum enzymes such as ALT, AST, ALP and LDH were measured with autoanalayser in serum. In addition, we determined the chemical content of Castanea sativa propolis.

We found that LDL level was increased and HDL level was decreased in the ethanol treatment group while HDL level was increased and LDL level was decreased in propolis treatment group. There was a decrease in cholesterol and trigliceride level in the propolis treatment group. Also, there was a decrease in ALP and AST enzyme activities, but LDH enzyme activity was increased in propolis treatment group compared with alcohol group. In conclusion, no any toxic effect of Turkish C.sativa propolis was found while it caused HDL level was increased and LDL level was decreased in this study. This is protective effect on the atherosclerosis.

Key words: Castanea sativa, Propolis, antioxidant, HDL, LDL, Liver enzymes.

INÍCIO DE UM PROGRAMA DE SELEÇÃO DE ABELHAS AFRICANIZADAS PARA A MELHORIA NA PRODUÇÃO DE PRÓPOLIS

Departamento de Genética, Faculdade de Medicina de Ribeirã Preto, USP. CEP:14.049-900, São Paulo, Brasil.

Some colonies of honey bees collect much more propolis than others. This trait could be under genetic control. We investigated this possibility during two experiments done, April to July 1999 and December 1999 to March 2000 in the "cerrado" forest reserve Pé de Gigante in São Paulo state, Brazil. During the first phase we measured propolis production and correlation with honey production, and during the second phase we evaluated the quality of propolis produced during the rainy season. We initiated a genetic breeding program to improve propolis production and we also determined the flavonoides in propolis collected during the rainy station. One hundred africanized colonies were used. Dunn’s test was used, the propolis was collected three times, and weighted. Two colonies were selected by quantity and quality propolis (green) production. Only 25 colonies produced propolis (CPM) with average of 87,45 g propolis/hive and another colonies no collected propolis (CM).Had highly significant difference between colonies propolis production (CPM) with values of 26,98 kg honey/colonies and 13,23 kg honey/colonies for colonies no propolis productive(CM). The results obtained under this condition, showed direct correlation between propolis production and honey production. The flavonoides percentage of the colonies selected had significant higher than another colonies (23) no selected.

Beijing bee-products institute. No. 256, Wanquansi, FengTai District, Beijing, China, 100073

*Hacettepe University, Science faculty, Department of Biology, 06532 Beytepe/Ankara/Turkey

**Hacettepe University Science faculty Department of Chemistry 06 530 Beytepe/Ankara/Turkey

The aim of the present work is to study the chemical composition of Turkish propolis. For this reason, propolis samples collected from different region of Turkey (Bursa, Erzurum-Askale, Gümüshane-Sögütagil and Trabzon-Çaglayan) in 1999. The ethanolic extracts of propolis (EEP) were prepared for chemical analysis. The Gas Chromatography (GC 5890, Hewlett-Packard, Palo Alto, CA USA) coupled with mass dedector (MS 572, Hewlett-Packard,Palo Alto,CA,USA ) was used for the ethanolic extracts of propolis. Our findings show that samples from Erzurum and Gümüshane region have shown the similar compound distribution on the GC chromatograms. In these samples aromatic and aliphatic acids and their esters and also ketone derivatives are the main group compounds. The percent ratio of these compounds is 85 % out of the total per cent. The rest mainly containes alcohol derivatives, flavavones and aldhyde derivatives. However, samples that they were were collected from Trabzon region and three different region of Bursa city are rich with the chalcones, long chain aliphatic acids and their esters, terpenoids, flavones and amino acids.

Key words: propolis , chemical analysis, Gas Chromatography, Mass spectrophotometry.

SUSCEPTIBILIDADE DE BACTÉRIAS DO GRUPO Bacteroides fragilis A ANTIMICROBIANOS E À PRÓPOLIS

Santos, F.A.^1,2 , Bastos, E.M.A. ³, Uzeda, M. ², Carvalho, M.A.R. ¹, Farias, L.M.¹ and Moreira, E.S.A.^1*

1 – Universidade Federal de Minas Gerais, Minas Gerais, Brasil 2 - Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brasil ; 3 - Fundação Ezequiel Dias - Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.

Própolis é uma substância resinosa coletada pelas abelhas a partir de várias fontes vegetais como brotos e exsudatos (Asis, 1991). Atualmente a própolis tem sido utilizada na medicina popular para várias finalidades e recentemente tem sido reconhecida a sua utilidade tanto na medicina humana quanto na medicina veterinária. A atividade antibacteriana da própolis, contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, e também as atividades antifúngica, antiviral e antiprotozoário foi revisada por Marcucci (1995). Bactérias do Grupo Bacteroides fragilis são os anaeróbios predominantes no cólon e a espécie B. fragilis é comumente encontrada em processos infecciosos (Summanen et al., 1993). O aumento da resistência a antimicrobianos normalmente utilizados contra essas espécies bacterianas tem sido relatada nas duas últimas décadas (Snydman et al., 1996 e 1999; Labbié, et al., 1999). Algumas espécies como B. distasonis, B. thetaiotaomicron e B. vulgatus parecem ser mais resistentes a antimicrobianos do que as outras espécies do grupo (Bianchini et al., 1997). Várias bactérias podem ser isoladas de primatas humanos e não-humanos as quais podem ser utilizadas em estudos de microbiologia comparada (Eke et al., 1993).

THE EFFECT OF SOME TURKISH PROPOLIS ON THE PRODUCT QUANTITY OF Agaricus bisporus (Lange.) Sing

* Kirikkale University, Faculty of Science and Art, Department of Biology,Kirikkale-TÜRKIYE

**Hacettepe University,Science Faculty, Department of Biology,06532 Beytepe/ANKARA/TURKEY

***Hacettepe University,Science Faculty, Department of Chemistry,06532 Beytepe/ANKARA/TURKEY.

In this study, the effect of some Turkish propolis on the product quantity of cultivated mushroom Agaricus bisporus (Lange.) Sing. was determined. The examples of propolis were obtained from the different regions of Türkiye (Bursa and Erzurum). Propolis extracts were prepared as 0.5 EEP and 2.0 EEP for each two regions. The prepared extracts were sprayed to compost, compost + casing soil and compost + casing soil + 1.flush of Agaricus bisporus at different times of growth period at under controlled laboratory conditions. Propolis, showed stimulatory effects on the development stages some parameters of the yield. Further more, early yield of mushrooms, rapid growing and increase of total weight of harvested basidiocarps were detected. On the other hand, the control group was used without propolis. The primordium and basidiocarp formations showed great reductions. Chemical analysis of all the harvested mushrooms that were cultivated under on the production conditions with propolis were made by gas chromotography (GS)- mass spectrophotometry (MS).

Presidente:	Sr. Daniel Groppa Presidente de REINO S.A.
Secretario:	Ing.Agr. Víctor Groppa Gerente General de REINO S.A.
Tesorero:	Ing.Qco. Luis Maldonado Investigador del Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria.

08:30 hs	Inscripción.
10:00 hs	Apertura.
10:30 hs	Perfil de los propóleos argentinos. Ing. Luis Maldonado (Argentina).
11:15 hs	La experiencia de CONAP en el mercado de propóleos brutos y elaborados. Sr. Irone Martins de Sampaio, Presidente de CONAP. (Brasil)
11:45 hs	Parámetros cuali-cuantitativos del propóleos. Situación en Brasil. Dr. Osmar Malaspina (Brasil).
12:45 hs	Almuerzo
14:30 hs	Generalidades de la Apiterapia. Evaluación de algunas propiedades biológicas del propóleos. Dr. Walter Fierro Morales (Uruguay).
15:30 hs	Situación actual de la fitoterapia y la inserción de los productos de origen apícola. Propiedades biológicas de principios activos de origen vegetal contenidos en el propóleos. Dr. Jorge Podlsky (Argentina).
16:00 hs	Sinopsis del Congreso Egipcio de Propóleos y utilización en la región. Dr. Ahmed G. Hegazi (Egipto).
16:30 hs	Intervalo.
17:00 hs	Situación actual y perspectivas del propóleos en Japón. Avances en investigación. Dr. Mitsuo Matsuka (Japón).
18:00 hs	Entrega de premios a los mejores Trabajos Científicos y del Concurso Fotográfico.

08:30 hs	Presentación de Trabajos Científicos.
09:30 hs	Producción de propóleos. Téc. Humberto Yanusi (Argentina).
10:00 hs	Análisis de peligros y puntos críticos de control en la producción de propóleos. Dr. Guillermo Salamanca (Colombia)
10:30 hs	Efecto de la cosecha y almacenaje sobre la calidad de propóleos. Dr. José Maidana (Argentina).
11:15 hs	Intervalo.
11:30 hs	Impacto de la producción de propóleos sobre la economía apícola. Ing. Rodolfo Ceci (Argentina).
12:30 hs	Mercado de propóleos. Ing. Víctor Groppa (Argentina).

08:30 hs	Presentación de Trabajos Científicos.
10:00 hs	Avance de las investigaciones en Brasil. Dr. Y.K. Park (Brasil).
11:00 hs	Intervalo.
11:15 hs	Minisimposio. Antioxidantes, Radicales Libres y el Propóleos. Antioxidantes en la prevención de enfermedades. Dr. Ricardo Ferreira (Argentina) Capacidad antioxidante de los polifenoles del propóleos. Dr. Walter Fierro Morales (Uruguay)
12:30 hs	Almuerzo

14:30 hs	Mesa Oficial (SAGPyA, SENASA, INAL, ANMAT).
15:30 hs	Análisis de propóleos en el mundo. Dr. Mitsuo Matsuka (Japón)
16:30 hs	Intervalo
16:45 hs	Caracterización de propóleos argentinos. Ing. Enrique Bedascarrasbure (Argentina).
17:30 hs	Conclusiones.
18:00 hs	Cierre.

Provincia	Buenos Aires	Mendoza	Catamarca	Tucumán	Chaco	Sgo. del Estero	La Rioja
Promedio (mm)	14,20	14,50	17,16	16,74	12,97	12,25	13,50