อภิปรายและสรุปผลการทดลอง

อภิปรายและสรุปผลการทดลอง

อภิปรายผลการทดลอง

สารที่ไม่มีขั้วจะละลายในตัวทำละลายที่ไม่มีขั้ว ส่วนสารที่มีขั้วจะละลายในตัวทำละลายที่มีขั้ว ดังนั้นสารที่ได้จากการทดลองตอนที่ 1 จึงเป็นสารที่ไม่มีขั้ว
สารแต่ละชนิดมีความสามารถในการละลายและการถูกดูดซับที่ต่างกัน ในการทดลองตอนที่ 2 ใช้เมทานอลเป็นตัวทำละลายและใช้ Sephadex เป็นตัวดูดซับ ดังนั้นสารที่ออกมาก่อนจะเป็นสารที่มีขั้วต่ำ
จากสเปกตรัมของสารในการทดลองที่ 3 vial ที่ 3,4,8,9,21 สามารถนำมาวิเคราะห์โ ครงสร้างทางเคมีของสารได้ดังแสดงในสเปกตรัมหน้าต่อไป

จากสเปกตรัมสามารถสรุปการวิเคราะห์สูตร โครงสร้างทางเคมีของสารในvialที่ 21
จาก¹H-NMR สเปกตรัม สรุปได้ว่า
ที่ chemical shift 2.34 ppm มีสัญญาณของหมู่เมทิลโปรตอน 1 โปรตอน
ที่ chemical shift 6.72-7.27 ppm มีสัญญาณของโปรตอน 3 โปรตอน
ที่ chemical shift 12.05-12.79 ppm มีสัญญาณของ OH ( phenolic) โปรตอน 2 โปรตอน
จาก¹³C-NMR สเปกตรัม มี 15 สัญญาณของ C ในช่วง chemical shiet ที่ 21.45- 189.43 ppm
จากเทคนิค HMQC ทำให้สามารถเชื่อมโยงความสัมพันธ์ของโปรตอนที่อยู่บนคาร์บอนได้ เช่น H-3 (d =6.72)อยู่บนC-3,H-6(d =7.09)อยู่บนC-5ดังตาราง

ตารางที่ 7 แสดงค่าchemical shift ของโปรตอนที่อยู่บนคาร์บอน

คาร์บอนที่

ค่าd (ppm)

ค่าd (ppm)ของHที่อยู่บนคาร์บอน

3

6

8

11

107.1

123.5

120.3

21.4

6.72

7.09

7.27

2.34

จากเทคนิค HMBC จะให้สัญญาณ correlation จาก

H-3กับC-1,C-2,C-4และC-4a

H-6กับ C-8 C-11 และC-5a

H-8กับ C-6,C-9 C-11 และC-5a ดังตาราง

ตารางที่ 8 แสดงค่า chemical shift ของโปรตอนข้างเคียง

คาร์บอนที่

ค่าd (ppm)

ค่าd (ppm)ของHข้างเคียง

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

1a

4a

5a

8a

108.8

160.9

107.1

164.6*

164.3*

123.5

148.0

120.3

182.0

189.4

21.4

133.2

123.6

113.1

131.2

6.72 12.79

12.79

12.79

-

7.27 2.34 12.05

-

7.09

7.27

-

7.09 7.27

-

6.72

7.27 7.09 12.05

-

หมายเหตุ * ค่า d (ppm) นี้สามารถสลับกันได้

จากการวิเคราะห์ดังกล่าวสามารถนำมาเขียนเป็นสูตรโครงสร้างของสารในvialที่ 21 ได้ดังนี้

จากสูตรโครงสร้างสารนี้คือ skrin

สารในvialที่ 8,9
จาก ¹H-NMR สเปกตรัม สรุปได้ว่า

ที่ chemical shift 2.44 ppm มีสัญญาณของหมู่เมทิลโปรตอน 1 โปรตอน

ที่ chemical shift 2.51 ppm มีสัญญาณของหมู่อะซีโตน

ที่ chemical shift 2.80-7.46 ppm มีสัญญาณของโปรตอน 5 โปรตอน

ที่ chemical shift 5.49 ppm มีสัญญาณของ OH (hydroxyl) โปรตอน 1 โปรตอน

ที่ chemical shift 11.65 ppm มีสัญญาณของ OH ( phenolic) โปรตอน 2 โปรตอน

จาก¹³C-NMR มีสัญญาณของ C ในช่วง chemical shift ที่ 21.4-193.9 ppm 15 สัญญาณ

จากเทคนิค HMQC สามารถเชื่อมโยงความสัมพันธ์ของโปรตอนที่อยู่บนคาร์บอนได้ดัง ตาราง

ตารางที่ 9 แสดงค่าchemical shift ของโปรตอนที่อยู่บนคาร์บอน

คาร์บอนที่

ค่าd (ppm)

ค่าd (ppm)ของHที่อยู่บนคาร์บอน

1

2

3

6

8

11

47.7

68.4

58.2

124.0

120.5

21.4

3.36

4.40

2.80*

7.20

7.46

2.44

หมายเหตุ * จากพีกจะเห็นเป็นdoublet peakแต่ถือว่าเป็นพีกเดียว เกิดจากโปรตอนข้างเคียง

จากเทคนิค HMBC จะให้สัญญาณ coorrelation จาก

H-1 กับ C-3,C-1aและ C-4a

H-2 กับ C-9และ C-1a

H-3 กับ C-1,C-9,C-10และ C-4a

H-6 กับ C-8,C-11,C-4aและ C-5a

H-8 กับ C-6,C-10,C-11, C-5aและ C-4a

H-11 กับ C-7และ C-8 ดังตาราง

ตารางที่ 10 แสดงค่าchemical shift ของโปรตอนข้างเคียง

คาร์บอนที่

ค่าd (ppm)

ค่าd (ppm)ของโปรตอนข้างเคียง

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

1a

4a

5a

8a

47.7

68.4

58.2

180.6

160.1

124.0

147.5

120.5

185.9

193.9

21.4

55.5

106.1

114.1

131.9

2.80

-

3.36

-

-

7.46 , 2.44

2.44

7.20 , 2.44

2.80

2.80

7.46 , 7.20

4.4 , 3.36

3.36 , 2.80

7.46 , 7.20

-

จากการวิเคราะห์ดังกล่าวสามารถนำมาเขียนเป็นสูตรโครงสร้างทางเคมีของสารในvialที่8,9ได้ ดังนี้

จากสูตรโครงสร้างสารนี้คือ rugulosin

หมายเหตุ สารในvialที่ 3,4 นั้นคือสาร zeorin ซึ่งเป็นสารที่พบทั่วไปในราชนิดนี้พบเป็นสารสุดท้ายจึงทำไม่สามารถทำการตรวจสอบโครงสร้างทางเคมีของสารด้วยเทคนิคHMQC และ HMBC ได้ทัน หากผู้ใดสนใจสามารถอ่านรายละเอียดของสารนี้ได้ที่ภาคผนวก

สรุปผลการทดลอง

ได้สารบริสุทธิ์ 3 ชนิดคือ skyrin เป็นของแข็งสีส้มอมน้ำตาล, rugulosin เป็นของแข็งสีเหลืองส้มและ zeorin เป็นของแข็งสีน้ำตาลและเมื่อนำไปทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ พบว่า rugulosin มีความเป็นพิษต่อเซลล์ตัวอ่อนของผีเสื้อ,เซลล์ไตของหนูและเซลล์หนู ส่วน skyrin มีความเป็นพิษต่อเซลล์ตัวอ่อนของผีเสื้อและเซลล์ตับของคน

ซึ่งสารทั้ง 3 มีสูตรโครงสร้างทางเคมีดังนี้

รูปที่ 26 แสดงโครงสร้างทางเคมีและลักษณะของสาร skyrin

รูปที่ 27 แสดงโครงสร้างทางเคมีและลักษณะของสาร Rugulosin

รูปที่ 28 แสดงโครงสร้างทางเคมีและลักษณะของสาร zeorin

;

ประโยชน์ที่ได้รับ

1.ได้สารบริสุทธิ์ที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพ

2.ฝึกทักษะกระบวนการทางวิทยาศาสตร์

3.รู้จักการทำงานและมองเห็นภาพพจน์ของการเป็นนักวิทยาศาสตร์ได้ชัดเจนขึ้น

4.ปลูกจิตสำนึกของการเป็นนักวิทยาศาสตร์